学界研圈_万维书刊

171.流式细胞术技巧攻略！

[摘要]：文献中我们经常能看见这种图，也就是流式结果分析图，美观、简单、一目了然。流式细胞术（flowcytometry）是20世纪60年代后期开始发展起来的利用流式细胞仪快速定量分析细胞群的物理化学特征以及根据这些物理化学特征精确分选细胞的新技术，主要分为流式分析和分选2部分。今天我们主要介绍流式分析中基本操作与技巧，首先简要了解一下什么是流式细胞术。一、流式细胞术的3大要素1.流式细胞仪：现在市面上有多... [发表时间：2024/2/1 15:34:53]
172.【实验分享】轻松掌握细胞克隆方法

[摘要]：实验原理细胞克隆形成实验是用来检测细胞增殖能力、侵袭性、对杀伤因素敏感性等项目的重要技术方法。当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，成为集落或克隆。其中细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。克隆形成的目的1... [发表时间：2024/2/1 15:34:02]
173.【5分钟讲透实验】质粒构建实验影响因素汇总

[摘要]：质粒构建：英文名为plasmidconstruction。选定的目的外源基因（DNA）先要经过PCR扩增。随后用限制性内切酶分别切割载体和外源DNA片段，再使用DNA连接酶将切割后的载体与DNA片段连接，转入宿主细胞。最后经过筛选鉴定出正确的重组克隆质粒，实现目的基因在宿主细胞内的正确表达。如何选择载体？载体通常分为克隆载体（CloningVector）与表达载体（ExpressionVector... [发表时间：2024/2/1 15:33:27]
174.RT-qPCR检测的一步法与两步法优缺点

[摘要]：RT-qPCR检测定量逆转录PCR（quantitativereversetranscriptionPCR,RT-qPCR）是应用于以RNA作为起始材料的PCR实验中的一种实验方法。在该方法中，总RNA或信使RNA（mRNA）首先通过逆转录酶转录成互补DNA（cDNA）。随后，以cDNA为模板进行qPCR反应。RT-qPCR已被用于多种分子生物学的应用中，其中包括基因表达分析、RNA干扰验证、微阵... [发表时间：2024/2/1 15:28:39]
175.一文带你了解11项细胞因子

[摘要]：细胞因子(cytokine，CK)是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质，具有调节固有免疫和适应性免疫、细胞生长以及损伤组织修复等多种功能。细胞因子可被分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。细胞因子在体内通过旁分泌、自分泌或内分泌等方式发挥作用，具有多效性、重叠性、拮抗性、协同性等多种生理特性，形成了十分复杂的细胞因子调节网络，... [发表时间：2024/2/1 15:27:04]
176.[实验技能]CCK-8实验最全操作步骤

[摘要]：CCK-8是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的细胞生物学实验。CCK-8溶液可以直接加入到细胞样品中，不需要预配各种成分。细胞增殖越多越快，细胞颜色越深，证明毒性小；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅(生成的formazan量)和细胞数，目呈线性关系。实验材料及试剂细胞，96孔细胞培养板、CO2培养箱、酒精灯、微量移液器、酶标仪、CCK-8试剂盒等。实验步骤1.取生长状态良好的... [发表时间：2024/2/1 15:26:30]
177.原代细胞织块培养法实验操作流程详解

[摘要]：原代细胞（Primarycells）：是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。原代细胞培养是指将组织从动物体内取出，经各种酶、螯合剂(常用EDTA)或机械方法剪碎处理，分散成单细胞，在合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖的过程。细胞的分离纯化和细胞培养技术是细胞生物学实验的基础。我们通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞。原代细胞分离培养实验流程:首先... [发表时间：2024/2/1 15:25:09]
178.免疫组化的基本原理和实验流程介绍

[摘要]：免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。它是组织化学的分支，它是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行组织和细胞原位检测技术。一、免疫组化... [发表时间：2024/2/1 15:23:09]
179.为什么提取植物RNA这么难？如何解决？

[摘要]：1为什么提取植物RNA这么难？植物RNA提取中常见的问题是提取产物的总量少，RNA质量差。植物的细胞中有很多代谢物，如蛋白质、脂质、多糖和次生代谢物等。进行RNA提取时，必须裂解细胞破坏植物膜释放RNA，在裂解步骤中RNA不可避免会与这些代谢物混合。这些代谢物在结构上与核酸相似，会发生共沉淀反应，从而降低了RNA提取的产量和质量。抽提足够的高质量植物RNA的难点就在于将RNA与这些代谢物进行分离。... [发表时间：2024/2/1 15:21:37]
180.荧光定量PCR实验中对照类型介绍

[摘要]：qPCR从样本采集到结果检出有很多的步骤，包括样本采集、样本保存、样本处理、样本检测、数据分析等一系列环节，不同的环节可以选择不同的对照进行监测，对照总体可分为阴性对照与阳性对照两类：阴性对照实验中经常遇到无法判断反应孔中的扩增信号是样本真实扩增还是污染扩增的情况，这就需要阴性对照来作为对比。常见的阴性对照有以下几种：● 无模板阴性对照(NoTemplateControl,NTC)NTC一般用纯化... [发表时间：2024/2/1 15:20:10]

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