学界研圈
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191.大肠杆菌化学转化原理和问题解决
[摘要]：1DNA要进入细胞需要克服的困难困难1：DNA带负电荷，细菌的细胞膜也带负电荷，需要克服DNA和细胞膜间的电荷排斥作用；困难2：DNA进入细胞需要细胞膜上有孔隙。图1.DNA和细菌细胞膜的电荷排斥克服电荷排斥化学感受态细胞转化的第一步，加入DNA后，轻弹管壁混匀，冰上静置，使Ca2+与DNA结合中和DNA的负电荷，Ca2+与细菌细胞膜结合中和电荷，克服了外来DNA和细菌细胞膜之间的负电荷排斥作用。... [发表时间：2024/2/1 15:08:05]
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192.电子分析天平可以准确称量毫克级样品吗？
[摘要]：01电子分析天平可以称量毫克级样品吗？如果询问100个同学，相信有99个同学都会回答：当然可以呀！我们一直都是这样使用的，也没有任何问题。还有同学可能会回答：因为这台电子分析天平的可读性0.1mg，当然可以称量毫克级样品，有啥问题呢？然而，专业的称量专家在回答这个问题时，通常会问一个问题，比如：您能接受的称量误差是多少？因为一台天平是否可以准确称量您的样品，并不是取决于这台天平的可读性，而是取决于... [发表时间：2024/2/1 15:06:35]
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193.一文看懂-如何选择重组蛋白表达系统
[摘要]：得益于生物资源和相关基因序列数据如今能够随时便捷获取，加上蛋白质生产系统的进步，许多实验室开始自行生产用作生物试剂的蛋白质。这使研究人员能够控制实验中使用的蛋白质的成本、可用性和质量。然而，许多在各自实验室负责生产重组蛋白的研究人员对现有的基因表达系统几乎没有或根本没有经验。这篇指南的核心是评估了最常用的基因表达系统的关键特征，以此指导准备开始蛋白质生产的研究者选择最适合其需求和资源的系统。系统的... [发表时间：2024/2/1 15:03:22]
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194.WB-蛋白Marker那些事
[摘要]：1蛋白Marker的作用要了解蛋白Marker的作用，首先需要了解SDS-PAGE电泳分离蛋白的原理，在电泳中，分子量越小的蛋白遇到的阻力更小，移动得越快，跑到凝胶前沿；分子量越大的蛋白遇到的阻力更大，移动得更慢，留在凝胶的上端（注意这和分子筛层析原理不同）。为了确认目标蛋白的分子量，就需要一个参考组，让具有指示性的蛋白Marker与样品一起电泳，由于蛋白Marker分子是确定的，就可以通过目标蛋... [发表时间：2024/2/1 14:58:23]
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195.Western blot 中Tween-20作用是什么？
[摘要]：Westernblot的洗液TBST是实验室常用的配制液体，对于TBST的配方也基本上相差不多，其中配方中就有一种组分是Tween-20，一种黄色或琥珀色澄明的油状液体，具有特殊的臭气和微弱苦味。用移液枪吸取时会有一种滞后感。为什么在Westernblot的洗液TBST中要加入这么一种试剂，Tween-20在Westernblot中在发挥什么样的作用呢？1Tween-20首先了解一下什么是Twee... [发表时间：2024/2/1 14:56:31]
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196.RNA质量好不好决定下一步实验成败
[摘要]：导读合格的RNA样本是进行很多实验的前提，RNA质检有很多种方法，相对来说，琼脂糖凝胶电泳是一种非常好的RNA质检方法，既能检测RNA的完整性和浓度，还能判断RNA样本中是否有蛋白和gDNA的污染情况，而且不需要依赖特殊昂贵的仪器设备。但是RNA电泳虽然简单，也有很多注意事项，如果稍有不慎，电泳过程中RNA样本发生降解，即使合格的样本也会显示出不好的质检结果。RNA电泳VS其它检测方法常用的RNA... [发表时间：2024/2/1 14:54:48]
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197.实例讲解特殊蛋白WB实验技巧
[摘要]：Westernblotting（免疫印迹分析）是一种常用的蛋白质检测技术，用于检测样品中特定蛋白质的存在和定量。WB作为一个最为基础的生命科学检测方法之一，经过长时间摸索与分析，目前已经有了一系列适配性较高的通用WB实验检测方案和流程。但是蛋白质作为一个特异性较强的检测指标，总会有一些并不适用于常规化方法的个体，需要我们对实验步骤进行优化或者修改，才能保证得出一个较为理想的结果。小分子蛋白小分子蛋... [发表时间：2024/2/1 14:52:10]
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198.一抗怎么选？
[摘要]：为了缩小选择范围，实验中通常要考虑以下几个方面：1.分析或者应用类型2.样品的性质3.样品的物种4.一抗的宿主物种5.抗体的标记和检测1应用识别相同蛋白的不同抗体，由于识别位点不同，决定了不同的使用用途。例如，许多抗体识别位点位于折叠蛋白的内部，因此抗体只能识别降解或变性蛋白，这样的抗体往往只能应用于westernblotting。有的抗体能够识别自然折叠状态上的表位。这样的抗体可应用于IHC、I... [发表时间：2024/2/1 14:51:28]
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199.生物安全柜操作规范的20条军规！
[摘要]：作为生物安全实验室的一级屏障，生物安全柜是科研或医疗实验室中重要的硬件装备，为了让实验室人员规范使用生物安全柜，现归纳出以下注意事项，希望大家在实际操作中尽可能规避风险。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的，在使用时一定要遵从其标准操作规程。但是您真... [发表时间：2024/2/1 14:50:44]
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200.生物学实验常用抗生素的选择和配方
[摘要]：1抗生素原理现代实验室研究的细胞多以原核细胞、真核细胞为主，为了独立研究某类细胞，需要抑制其他类型细胞的增殖，例如养293T时加青霉素/链霉素，抑制潜在的原核细菌增殖，但又不影响293T的功能。那抗生素是什么机制呢？这个首先了解一个细菌或者细胞想要存活，需要以下条件正常进行： DNA复制：在DNA聚合酶作用下，DNA自身得到复制，有丝分裂时每个细胞一套DNA；转录、RNA形成过程：在RNA聚合酶催... [发表时间：2024/2/1 14:50:03]
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