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学界研圈

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  • 141.支原体检测与清除攻略

    [摘要]:在养细胞的过程中,总会有一些不速来客,它们总会不请自来,比如真菌、霉菌。但最令人头疼的还是支原体,它总是悄悄的来,对细胞造成极大的危害,今天就来认识一下支原体。1支原体是什么?支原体是目前为止发现的最小的原核生物,具有以下特点:1.形态结构与细菌相似,但又比细菌小,是介于细菌与病毒之间的微生物;2.结构简单,只有细胞膜、细胞质、核糖体、DNA、可溶性RNA和一些其它细胞内含物,支原体的细胞器只有核... [发表时间:2024/2/1 16:17:28]

  • 142.TUNEL法检测细胞凋亡原理和经验

    [摘要]:细胞凋亡中,染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUN... [发表时间:2024/2/1 16:16:09]

  • 143.常用的蛋白分析技术——WB实验操作步骤详解

    [摘要]:WB实验,是一种常用的蛋白分析技术。实验中每一步的把握,将会直接影响结果的显现。本文将给大家展示WB实验的详细操作步骤。蛋白样品的提取及蛋白含量的检测蛋白样品的好坏,直接决定了能否做出来蛋白条带,所以蛋白样品的提取需严格按照试剂盒说明书进行。凝胶配制凝胶选择:请根据蛋白分子量的大小,选择合适浓度的分离胶,可参考凝胶配置试剂盒中的说明书,或者参考文献。配胶的APS需要在4°的冰箱中保存。注意,配胶的... [发表时间:2024/2/1 16:15:37]

  • 144.根据孔数、形状、处理方式、颜色选择细胞培养板的方法

    [摘要]:细胞培养是一种基本的生命科学研究技术,已成为现代生物医学研究的重要手段。细胞培养板是细胞培养实验中常用和重要的实验室耗材,选择合适的细胞培养板对细胞的生长和实验结果的准确性有至关重要的影响。细胞培养板根据底部形状的不同可分为平底、圆底(U型)和V底(V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536孔等;表面处理方式有TC处理和超低吸附处理;颜色有透明色、白色、黑色等。那么如何从这... [发表时间:2024/2/1 16:14:56]

  • 145.蛋白质不表达,原因很简单啊

    [摘要]:1载体构建错误这个屡见不鲜,很多克隆新人经常弄错读码框。比如Qiagen的pQE系列载体,其克隆位点常有一两个碱基的区别;另外有些酶产生粘端有些酶产生平端,这些都容易导致读码框错误,从而表达不出来。2宿主菌选择不当不同的宿主菌其基因型是不一样的。有些经过特殊修饰的载体,或者特殊用途的载体,或者有特殊启动子的载体,必须选择合适的宿主菌进行表达。因此,当你的蛋白没有表达出来时,可以考虑更换宿主菌。见下... [发表时间:2024/2/1 16:12:56]

  • 146.液体培养基组分介绍及常见问题解答

    [摘要]:细胞培养,是人工创造与体内生长相似的环境,使细胞生长、繁殖并维持主要结构和功能的技术。培养基是一切体外培养的基础,为细胞的生长和代谢活动提供了各种必需的营养物质。1培养基的前世今生根据培养基的来源和组成成分,它的发展经历了三个阶段,分别是天然培养基阶段、合成培养基阶段以及无血清培养基阶段。在20世纪50年代,当时体外培养普遍直接采用组织凝块、生物性液体和组织提取液,如血浆凝块、血清、淋巴液、胚胎浸... [发表时间:2024/2/1 16:11:12]

  • 147.摇床分类选型指南

    [摘要]:摇床应用于细胞培养、发酵、分子杂交、蛋白印迹及各类生物化学反应,广泛应用于医学、生物学、分子学、制药、食品、环境等行业。一般来说,根据摇床的运动方式来分,可以分为圆周摇床、线性摇床、翘板摇床、三维摇床。1圆周摇床圆周摇床通过圆周运动的方式,提供高效的振荡混匀,适配各种培养皿,锥形瓶和培养瓶等;主要应用于细菌重悬、溶解性研究、细菌及酵母培养、提取洗脱过程、诊断检测、杂交、通用混匀、印迹&洗脱等应用等... [发表时间:2024/2/1 16:10:13]

  • 148.如何制备化学感受态细胞?

    [摘要]:几乎所有分子生物学实验室的科研小白都需要学习设计、修饰或者构建质粒,今天我们就来介绍一下如何制备化学感受态细胞吧。 Plasmid1一、什么是化学感受态细胞?在说化学感受态细胞之前,我们要先清楚一个概念:感受态。细胞能够从周围环境中摄取DNA分子,并且不易被细胞内的限制性核酸内切酶分解时所处的一种特殊生理状态称感受态(competence)。自然环境中细菌可以吸收外源遗传物质以增加自身对环境的适应... [发表时间:2024/2/1 16:09:41]

  • 149.免疫组化4种结果分析方法,你都做对了么?

    [摘要]:免疫组化简介免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)技术,是一项利用抗原抗体反应,通过使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原,对蛋白定位,定性的实验技术。广泛的应用于基础研究和临床病理诊断,在基础研究中可用于确定细胞内抗原,并对其进行定位、定性及定量的分析,在临床病理诊断方面,可用于判断肿瘤的来源、分类和鉴别诊断及评估临床治疗。免疫组化主要用的是组织标本和细胞标本两大类... [发表时间:2024/2/1 16:08:20]

  • 150.干货分享 | get这些常规细胞实验,高分文章稳了

    [摘要]:细胞实验可谓是最基础也是最重要的实验体系之一,我们可以通过细胞实验产生的数据制作基础疾病模型、了解药物对细胞的影响、检测信号通路……细胞的实验操作就像赛跑,你比别人跑的快,就比别人多发几篇SCI…掌握这些常规细胞实验,研究课题也会进展得更加顺利~细胞增殖实验细胞增殖与细胞凋亡、细胞周期等是肿瘤研究的重要表型,是分子生物学和药理学研究解决的问题之一。通过在细胞中过表达或干扰某个基因研究基因对细胞增殖... [发表时间:2024/2/1 16:07:33]

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