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学界研圈

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  • 132.如何制备化学感受态细胞?

    [摘要]:几乎所有分子生物学实验室的科研小白都需要学习设计、修饰或者构建质粒,今天我们就来介绍一下如何制备化学感受态细胞吧。 Plasmid1一、什么是化学感受态细胞?在说化学感受态细胞之前,我们要先清楚一个概念:感受态。细胞能够从周围环境中摄取DNA分子,并且不易被细胞内的限制性核酸内切酶分解时所处的一种特殊生理状态称感受态(competence)。自然环境中细菌可以吸收外源遗传物质以增加自身对环境的适应... [发表时间:2024/2/1 16:09:41]

  • 135.细胞转染的注意事项

    [摘要]:转染可谓是做生物学实验的大家经常会考虑的一项实验技术,大致原理也都是明白的。但是在实验时经常会遇到转染效率太低,以至于无法进行后续的实验。到底转染是什么呢?为什么转染效率不高呢?其实转染,就是在真核细胞里导入具有生物功能的核酸,并在细胞中维持其生物功能。转染方法的选择我们熟知且常用的转染方法主要有物理介导,化学介导,生物介导。物理介导方法:电穿孔法、显微注射和基因枪;化学介导方法:如经典的磷酸钙共... [发表时间:2024/2/1 16:02:25]

  • 134.干货分享 | get这些常规细胞实验,高分文章稳了

    [摘要]:细胞实验可谓是最基础也是最重要的实验体系之一,我们可以通过细胞实验产生的数据制作基础疾病模型、了解药物对细胞的影响、检测信号通路……细胞的实验操作就像赛跑,你比别人跑的快,就比别人多发几篇SCI…掌握这些常规细胞实验,研究课题也会进展得更加顺利~细胞增殖实验细胞增殖与细胞凋亡、细胞周期等是肿瘤研究的重要表型,是分子生物学和药理学研究解决的问题之一。通过在细胞中过表达或干扰某个基因研究基因对细胞增殖... [发表时间:2024/2/1 16:07:33]

  • 140.干货分享 | 各类细胞死亡的方式与机制总结

    [摘要]:1、Apoptosis(凋亡)细胞凋亡,为一种细胞程序性死亡。相对于细胞坏死(necrosis),细胞凋亡是细胞主动实施的。细胞凋亡一般由生理或病理性因素引起。而细胞坏死则主要为缺氧造成,两者可以很容易通过观察区分开来。细胞凋亡的发现:细胞凋亡分为外源性和内源性细胞凋亡:细胞的凋亡分为“内源性凋亡”和“外源性凋亡”。简单的说起来外源性凋亡就是,当它细胞接受到外界通知它死亡的信号的时候,它通过一系列... [发表时间:2024/2/1 15:57:43]

  • 138.PCR扩增效率如何评估?

    [摘要]:做过PCR的小伙伴都知道,PCR前期的验证引物探针性能和确定最适反应条件是确保正式实验顺利进行的前提。PCR实验中有个相当重要的工作——即是PCR扩增效率的评估。扩增效率是PCR检测性能最重要的指标之一,也是定量分析计算结果时所需要的参数。接下来,让小编给大家细细说来吧。什么是扩增效率PCR是一种DNA体外扩增技术,通常包括了30-50个循环周期。每个循环中,目标DNA分子的拷贝数最多会增加1倍。... [发表时间:2024/2/1 15:59:20]

  • 139.一文讲透如何选择荧光定量PCR耗材

    [摘要]:荧光定量PCR检测技术已成为当前病毒核酸检测的主要手段,除了高质量的检测试剂、参数稳定的荧光定量PCR仪外,所选用的检测耗材的质量,也会对检测结果的准确性及灵敏度产生很大的影响。那么如何选择荧光定量PCR耗材呢?1高纯度1)高品质、高纯度、高透明聚丙烯PP。2)洁净空间生产加工。QPCR耗材为什么一般都是PP材质的呢,为什么需要环境洁净?因为PCR/qPCR耗材通常会与试剂或样品直接接触,而聚丙烯... [发表时间:2024/2/1 15:58:46]

  • 131.摇床分类选型指南

    [摘要]:摇床应用于细胞培养、发酵、分子杂交、蛋白印迹及各类生物化学反应,广泛应用于医学、生物学、分子学、制药、食品、环境等行业。一般来说,根据摇床的运动方式来分,可以分为圆周摇床、线性摇床、翘板摇床、三维摇床。1圆周摇床圆周摇床通过圆周运动的方式,提供高效的振荡混匀,适配各种培养皿,锥形瓶和培养瓶等;主要应用于细菌重悬、溶解性研究、细菌及酵母培养、提取洗脱过程、诊断检测、杂交、通用混匀、印迹&洗脱等应用等... [发表时间:2024/2/1 16:10:13]

  • 136.干货 | 外泌体提取与纯化常见方法

    [摘要]:外泌体是一种细胞分泌的微小膜泡,大小为30~150nm的磷脂双分子结构,可在细胞间传递物质和信号。它在机体内广泛存在,如外周血、腹水、尿液、唾液、脑脊液等各种体液中。外泌体携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。但外泌体所存在的体液环境复杂,在尺寸、形态和生化特性等方面又存在着较大的差异,因此如何能有效地... [发表时间:2024/2/1 16:01:16]

  • 137.常用缓冲液配置-PBS缓冲液

    [摘要]:在生化实验中,经常会用到PB缓冲液和PBS缓冲液,那什么是PB和PBS?PB 是phosphatebuffer的缩写,一般称为“磷酸盐缓冲溶液”,依靠磷酸缓冲对(H2PO4-和HPO42-)起到维持溶液pH值的作用,阳离子则一般是Na+或K+。PBS 是phosphatebuffersaline的缩写,中文通常称为“磷酸盐缓冲盐溶液”,更准确地译名应该是“磷酸盐缓冲生理盐水”,是生化实验广泛使用的... [发表时间:2024/2/1 16:00:41]

  • 133.免疫组化4种结果分析方法,你都做对了么?

    [摘要]:免疫组化简介免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)技术,是一项利用抗原抗体反应,通过使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原,对蛋白定位,定性的实验技术。广泛的应用于基础研究和临床病理诊断,在基础研究中可用于确定细胞内抗原,并对其进行定位、定性及定量的分析,在临床病理诊断方面,可用于判断肿瘤的来源、分类和鉴别诊断及评估临床治疗。免疫组化主要用的是组织标本和细胞标本两大类... [发表时间:2024/2/1 16:08:20]

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