AC. 利用环状DNA链置换反应原位生成银纳米团簇检测微囊藻毒素-LR的双信号集成适配体传感器

以下文章来源于分析化学方法 ，作者科研小组

全文简介

受圆形DNA链位移反应（CD-SDRs）的信号积累和签名模板序列中银纳米簇（AgNCs）的原位生成的启发，为microcystin-LR（MC-LR）检测设计了双信号集成aptasensor。aptamer被编程为包含在无酶CD-SDR中，该CD-SDR使用MC-LR作为引物，并根据理想状态连续输出H1/H2 dsDNA。巧妙地，H1/H2 dsDNA富含签名模板序列，允许原位生成AgNCs信号探针。为了提高信号放大性能，调用了共反应加速策略和CRISPR-Cas12a核酸酶。H1/H2 dsDNA可以触发CRISPR-Cas12a核酸酶的附带切割性能：顺式切割减少了合成AgNC的签名模板序列，而反式切割可以进行荧光（FL）分析。与此同时，AuPtAg被选为衬底材料，以促进S2O82-还原反应，以增强电化学发光（ECL）基础信号。ECL和FL检测不会相互干扰，并提高了准确性和灵敏度，检测极限分别为0.011和0.023 pmol/L。这拓宽了设计信号放大双模传感策略的路径。

简介

（A）AgPtAu的XRD映射。Ag 3d（B）、Pt 4f（C）和Au 4f（D）的XPS光谱。AgPtAu的SEM（E）、TEM（F）、HRTEM（G）以及STEM和元素映射（H）图像。AgNCs的HRTEM（I）和粒度分布（（I）的插图）模式。

（A）构建双信号集成Aptasensor，用于MC-LR检测和在签名模板序列表面原位生成AgNC；（B）MC-LR触发的CD-SDR用于H1/H2 dsDNA输出；（C）CRISPR-Cas12a核酸酶的解理机制和FL信号的恢复；以及（D）共反应加速机制和ECL信号的增强

（A）ECL-电压曲线对应于PBS测试的不同改性电极（pH = 7.4），含有50毫摩尔/升S2O82–，a：GCE，b：AgNCs/GCE，c：AgNCs/AgPtAu/GCE。（B）ECL-电压曲线对应于在PBS中测试的不同改性电极（pH = 7.4），d：AgNCs/GCE和e：AgNCs/AgPtAu/GCE。（C）PBS（pH = 7.4）中不同改性电极的CV曲线，含有50 mmol/L S2O82–，a：AgNCs/GCE和b：AgNCs/AgPtAu/GCE。（D）不同条件下的发光机制。

（A）不同浓度MC-LR的aptasensor的ECL时间曲线：0.05、0.1、0.5、1、5、100、1、10、100和200 nM。aptasensor的IECL和MC-LR浓度的相关性（B）和线性（C）。（D）aptasensor的特异性分析：（a）空白，（b）MC-YR，（c）MC-LA，（d）脂多糖，（e）MC-LR，（f）MC-LR + MC-YR，（g）MC-LR + MC-LA，（h）MC-LR +脂多糖，以及（i）混合物。（E）aptasensor的稳定性实验。（F）aptasensor的内部和内部分析。

（A）不同浓度MC-LR的aptasensor的FL时间曲线：0 pM、0.05 pM、0.1 pM、0.5 pM、1 pM、5 pM、100 pM、1 nM、10 nM、100 nM和200 nM。aptasensor的IFL和MC-LR浓度的相关性（B）和线性（C）。（D）aptasensor的特异性分析：（a）空白，（b）MC-YR，（c）MC-LA，（d）脂多糖，（e）MC-LR，（f）MC-LR + MC-YR，（g）MC-LR + MC-LA，（h）MC-LR +脂多糖，以及（i）混合物。

相关成果以“Dual-Signal Integrated Aptasensor for Microcystin-LR Detection via In Situ Generation of Silver Nanoclusters Induced by Circular DNA Strand Displacement Reactions”，发表在国际学术期刊“Analytical Chemistry”上。

文献链接：点击阅读原文

https://doi.org/10.1021/acs.analchem.3c02568

转自：“NANO学术”微信公众号

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