如何进行细胞冻存、解冻方法以及细胞计数？

一、细胞冷冻保存

冷冻保存方法：

1. 传统方法：冷存管置于 4℃ 10 分钟→ -20℃ 30 分钟→ -80℃ 16～18 小时（或隔夜）→液氮槽 vaporphase 长期储存。

-20℃ 不可超过 1 小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入 -80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

2. 程序降温：利用已设定程序的等速降温机以 -1～-3℃/分钟之速度由室温降至（-80℃ 以下）-120℃，再放在液氮槽 vaporphase 长期储存。适用于悬浮型细胞与 hybridoma 之保存。

二、细胞冷冻活化

1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。

2. 细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常（例如产生单株抗体或是其它蛋白质）。

转自：“生物学霸”微信公众号

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