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基础医学实验(十八)——RIP

2022/12/28 13:55:06  阅读:263 发布者:

实验原理

RIP技术(RNA Binding Protein ImmunoprecipitationRNA结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术。其原理包括:用特异性抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白→清洗磁珠,防止非特异性的RNA的结合→RNA结合蛋白及其结合的RNA共沉淀,进行RNA纯化→结合的RNA序列通过RIP-ChIP,定量PCR和高通量测序鉴定。

实验步骤(磁珠法)

具体实验步骤参考Milipore RIP试剂盒说明书

1)裂解产物的配制

2)用于免疫沉淀的磁珠配制

3RNA结合蛋白-RNA复合物免疫共沉淀(RIP)

4RNA的纯化

5Input RNA的质量评估(可选)

6)免疫沉淀RNA的分析

转自:“精英汇科研服务”微信公众号

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