基础医学实验(十八)——RIP
2022/12/28 13:55:06 阅读:263 发布者:
实验原理
RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术。其原理包括:用特异性抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白→清洗磁珠,防止非特异性的RNA的结合→RNA结合蛋白及其结合的RNA共沉淀,进行RNA纯化→结合的RNA序列通过RIP-ChIP,定量PCR和高通量测序鉴定。
实验步骤(磁珠法)
具体实验步骤参考Milipore RIP试剂盒说明书
(1)裂解产物的配制
(2)用于免疫沉淀的磁珠配制
(3)RNA结合蛋白-RNA复合物免疫共沉淀(RIP)
(4)RNA的纯化
(5)Input RNA的质量评估(可选)
(6)免疫沉淀RNA的分析
转自:“精英汇科研服务”微信公众号
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