脂肪肝动物模型制备，学习下

脂肪肝（fatty liver）是指由于各种原因引起的肝细胞内脂肪堆积过多的病变，是一种常见的肝脏病理改变，而非一种独立的疾病。正常人肝组织中含有少量的脂肪，如甘油三酯、磷脂、糖脂和胆固醇等，其重量约为肝重量的3%～5%。如果肝内脂肪蓄积太多，超过肝重量的5%或在组织学上肝细胞 50%以上有脂肪变性时，就可称为脂肪肝。目前主要分为酒精脂肪肝（alcoholic fatty liver，AFL）和非酒精脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）。

01

四氯化碳（CCl4）加高脂乳剂诱发非酒精脂肪肝病动物模型

（1）复合高脂饲料的制备。基础饲料中添加成分（2% 胆固醇+10% 猪油+0.2% 丙基硫氧嘧啶+0.5%胆酸钠，构成比均为质量分数）。

（2）注射CCl4。雄性昆明小鼠，鼠龄12周，体重 26～ 28 g。腹腔注射体积分数5%的CCl4食用油（0.01ml/g，2次/周），注射8周。于高脂乳剂饲养第8周末，改为普通饮食，自由饮水1周。

02

高糖饲料诱发非酒精脂肪肝病动物模型。

SD大鼠，雄性，体重210～230 g，对照组给予正常饮食饮水，果糖组给予10%的果糖水，两组均给予标准饲料，每天记录进水量和进食量，每3天记录大鼠体重。第5周末结束造模。果糖饲料喂食，共5周。

03

氧四环素诱发非酒精脂肪肝病动物模型。

SD大鼠，雄性，体重210 ～230 g，模型组给予高脂饮食（即普通饲料加15%猪油、2%胆固醇、0.5%胆酸钠、5%蛋黄粉），并按 10 mg /100 g剂量给予氧四环素（每1ml针剂含药物 20mg）腹腔注射，每5天给药一次。正常对照组给予普通饲料喂养，在模型组注射氧四环素的同一时间，给予相同体积的生理盐水腹腔注射。两组饮水均为自来水，自由饮用。模型组于造模第4周末结束。

04

无水乙醇诱发酒精脂肪肝动物模型。

昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～25g，将小鼠随机分为实验组和对照组，称重后按体重确定灌胃量（0.2ml /10 g），正常组灌服蒸馏水，1次/天，模型组每天清晨灌服 50% 无水乙醇，各组小鼠连续灌胃15天。

判断标准

主要观察指标∶光镜下观察小鼠肝脏形态和病理变化，血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、胆固醇和三酰甘油，以及肝脏胆固醇和三酰甘油水平。取出完整肝脏，滤纸吸干表面水分后称质量，计算肝指数，肝指数=肝脏质量（mg）/体质量（g）×100%。完整分离肝脏左叶，40 g/l多聚甲醛固定、脱水、包埋、切片、苏木精-伊红染色、封固，光镜下观察肝组织病理变化并进行分级和评分。评分如下表所示。
脂肪肝组织病理变化分级及评分

小贴士

（1）复方高脂饮食结合低浓度CCl４腹腔注射的方法诱导的NAFLD模型，符合非酒精性脂肪肝病理演变的过程，也缩短了常规高脂饮食方法的成模周期。

（2）氧四环素诱发非酒精脂肪肝病方法的优点有时间短、费用低、药物毒性较CCl4低等，可模拟某些环境因素所致的NAFLD模型。

（3）果糖摄取过量是NAFLD的一个重要危险因素，该造模机制可能与肠道菌群过度生长和肠黏膜屏障通透性增高有关，进而导致门静脉内毒素浓度增加，激活kupffer细胞而引起致敏的肝组织脂肪变性造成肝损伤。

转自：“如沐风科研”微信公众号

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