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Western blot | 当你的条带出现这3种问题时,这样操作或许还能挽救!

2022/4/2 17:05:31  阅读:502 发布者:chichi77

当你的条带出现位置比预期低的原因?

目的蛋白经过剪切或降解

有相同或相似抗原表位的蛋白被抗体检测出

解决办法

样品准备时候要在冰上操作

加入蛋白酶抑制剂

更换抗体

当你的条带出现位置比预期略高的原因?

蛋白可能被糖基化

氨基酸基被修饰

解决办法

使用酶去除可能的蛋白修饰

检查抗原序列

当你的条带比较模糊的愿因?

是否转膜电压过高

转膜中是否有气泡残留

转膜缓冲液组分问题

解决办法

降低转膜电压

重新配制缓冲液

在电转之前小心的移除膜和胶之间的气泡

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