2022/4/1 13:39:18 阅读:673 发布者:chichi77
不少科研小白在看到RNAi、siRNA、shRNA、miRNA可能都会犯迷糊,这些概念怎么理解?shRNA病毒感染要怎么做?siRNA转染实验要注意什么?miRNA怎么预测?
RNAi:英文全称为 RNA interference,中文名为 RNA 干扰,这是一种在进化上高度保守的基因表达调控机制,能引起基因沉默。
siRNA:经典的 RNAi 通常由短双链 RNA 触发,这段短双链 RNA 就称为小干扰 RNA(small interfering RNA / short interfering RNA,siRNA)。
siRNA 能装载到 RISC 复合物(RNA-inducing silencing complex)上,并且结合到与其序 列同源的靶 mRNA 上,使靶 mRNA 降解。
在这过程中,真正使 mRNA 发生降 解的东西其实是 RISC 复合物中能切割核酸的组分,而 siRNA 只不过是个引路人,通过序列特异性的识别,把 RISC 复合物引导到靶 mRNA 上。
正是因为这种序列特异性的识别机制,我们就可以根据靶 mRNA 的序列来设计 siRNA 序列, 利用这么一个特异的 siRNA 来沉默靶 mRNA。
shRNA:siRNA呢,是由短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)为原料加工得来的,所以 shRNA 是 siRNA 的前体。
这样理了一下,我们就可以知道,RNAi 是一种现象,一种基因沉默的作用机制,siRNA 和 shRNA 都是具有一定结构特点的 RNA 序列。
作为科研小白,不仅被这些相似的词搞得晕头转向,更被各种糟心的实验结果折磨到崩溃……
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一、不同研究水平实验技术Protocol
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三、不同实验方法全流程
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细胞交互指的是一项研究里包含了两种细胞之间的相互作用,要做细胞交互的课题,我们首先需要观察到一种细胞能够影响另外一种细胞的现象,然后再对其进行分子层面的解析。
四、WB实验流程、注意事项、数据处理及写作
WB作为实验室必备实验,看似简单,实际步步带坑,实验室的小伙伴们或多或少都踩过它的坑,新上手的小白想要得到一张条带清晰、没有杂带、背景干净的,没有WB实验干货怎么行!
五、IHC实验流程、操作技巧、注意事项、图像分析
免疫组织化学是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。
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