常见细胞因子及其检测方法

细胞因子是由免疫细胞（如单核、巨噬细胞、T细胞、B细胞、NK细胞等）和某些非免疫细胞（内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等）经刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质。其作用是通过结合相应受体调节细胞生长、分化和效应，调控免疫应答。细胞因子，是细胞分化和行使功能时的产物，相当于人体内各类细胞间相互交的“信使”。它们被广泛地应用于医学诊断、抗癌治疗、免疫调节、以及自身免疫等多种领域。

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常见细胞因子

细胞因子可分为白细胞介素（interleukin, IL）、干扰素 （interferon, IFN）、肿 瘤 坏 死 因 子 （tumornecrosisfactor,TNF）、集落刺激因子（colony stimulating factor, CSF）、生长因子、趋化性细胞因子等。众多的细胞因子在体内通过旁分泌、自分泌或内分泌等方式发挥作用，同时具有多效性、重叠性、拮抗性、协同性等多种生理特性，从而形成较复杂的细胞因子调节网络，参与人体多种重要的生理功能。

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常见细胞因子检测方法

1、ELISA测定

酶联免疫吸附测定（ELISA）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。

特点：稳定性好、提高检出率、分子量大，操作简单、快速、敏感性高、特异性强、实验设备要求简单、应用范围广泛、无放射性污染、能定性及半微量、微量、超微量定量分析，是目前应用最广，发展最快的酶免疫学技术方法。

2、CBA测定

Cytometric Bead Array(CBA)是指细胞因子微球检测技术。即微量样本多指标流式蛋白定量技术是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。是一种基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。

特点：样本用量少，多指标检测；操作方便，节省时间；同一样本同时检测，误差小，精密度高；标准曲线自动测定，专用软件自动计算，检测范围宽，灵敏度高；无酶-底物背景干扰。

3、FCM测定

流式细胞术是一种生物学技术，用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。流式细胞术（Flow CytoMetry，FCM）是对悬液中的单细胞或其他生物粒子,通过检测标记的荧光信号，实现高速、逐一的细胞定量分析和分选的技术。

特点：可以检测依托流式平台检测同时检测多指标。

4、RT-PCR测定

细胞因子的mRNA寿命短且拷贝数低，因此难以在小量样本中进行检测。RT-PCR是一种能检测细胞内低丰度特异RNA的方法，其原理是首先以RNA为模板，在逆转录酶的催化下，合成与RNA互补的cDNA。然后以cDNA为模板，用PCR技术对靶序列进行扩增，使微量细胞因子的RNA经放大后检出。RT-PCR能检出单个细胞中少于10个拷贝的特异RNA，如同时放大内参照物（如β-Actin），即可对RT-PCR检出的细胞因子mRNA进行定量。

转自：“Super Lab”微信公众号

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