以下文章来源于Zto实验动物世界 ,作者Mr lucky yang
新学期刚开始,咨询开题报告和实验方案的同学和老师较多,本期我们就实验方案设计流程,给大家介绍下如何设计会比较方便快捷。
1.毕业论文标题
标题是整个毕业论文的精髓,高度凝练。如果自己没有头绪,我们建议可以在知网或者pubmed查找相关的硕博士论文,也可以多看看国自然标题,作为借鉴。
这里分享一些中医药院校的国自然标题及信息,可以参考:
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2.实验设计(以葛根芩连汤改善NAFLD为例)
2.1 葛根芩连汤物质基础研究(这块为前期基础,但相对费用较高)
关于复方的物质基础研究:包括提取物成分鉴定、入血成分分析、药代动力学、配伍比例研究、提取工艺研究、代谢过程分析等。
2.2 药效研究
比如NAFLD,那就需要造模非酒精性脂肪肝,造模细节,动物选择等;造模成功指标确定,肝指标检测、血清指标、生化指标(炎症、氧化应激)、血液指标等;肝脏组织的HE、油红染色病理观察;体重、粪便等指标观察监测。
2.3 作用机制摸索
在有药效的基础上,我们考察作用机制靶点、途径。比如我们可以取肝脏、血清开展代谢组学研究,也可以开展蛋白组学、转录组学等;取粪便开展肠道菌群研究;经费不足的同学老师可能会采用网络药理学的方法(系统药理学)。
最终的目的就是能够筛选到信号通路、代谢途径、或者肠道菌群调控等作用机制。肠道菌群的话,质量高点会用到粪便移植。
2.4 机制验证
这个验证方法有很多:比如分子对接、SPR;蛋白印迹;免疫组学等各种深入作用机制的方式方法,体现多样性和工作量。
3. 构思一个清晰逻辑的技术路线图
在实验设计基础上,绘制技术路线图,这里放个链接(点击可以学习):图文摘要绘制、技术路线图绘制。
4. 案例及技术路线
例如项目名:基于代谢组学探讨葛根芩连汤调控NRF2/HO-1改善非酒精性脂肪肝的作用机制研究(注意这是小编随机设想的)
【4.1】实验内容思路
写技术路线图之前需要明确该项目所需要做的内容及检测指标。
名称:基于代谢组学探讨葛根芩连汤调控NRF2/HO-1改善非酒精性脂肪肝的作用机制研究
研究内容:
1).葛根芩连汤的治疗非酒精性脂肪肝的整体药效
包括:体重变化、血清、脏器(脂肪肝、小肠等)
2).葛根芩连汤的治疗非酒精性脂肪肝的质量控制及活性成分
包括:提取工艺研究、LC-MS、UPLC含量测定、主成分分析、代谢组学等
3).葛根芩连汤各组分配伍研究
包括:配伍比例研究、药效活性成份筛选、药物配伍比例
4).葛根芩连汤抗NAFLD作用机制研究
作用机制研究可以首先用细胞考察机制,然后进一步用大鼠模型进行验证。先采用代谢组学对血清和肝脏组织进行代谢途径分析,最终确定线粒体能量代谢或氧化应激的代谢物或代谢途径;进一步采用线粒体功能紊乱来考察相关作用机制,因为线粒体反应性氧体系(reactive oxygen species ROS)的激活与非酒精性脂肪肝氧化应激具有重要联系。同时也可以考虑肝肠轴,及肠道微生态与非酒精性脂肪肝相关性。
【4.2】技术路线图设计
根据以上研究内容,可以想到:首先要明确葛根芩连汤具有抗NAFLD作用,这是第一层面;然后对其提取工艺、质量控制、配伍研究进行研究,这是第二层面;最后考察其作用机制,升级为第三层面。这样三个层次,也体现了多维度的理念。
具体过程就不写了,就是ppt绘制,操作较为简单,但是需要体现简洁明了。
技术路线图绘制结果如下:
你学会了不 赶紧试试设计实验吧!
转自:“如沐风科研”微信公众号
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