高品质高质量病理检测（二十七）—糖原（PAS）染色

一、染色原理

多糖分子是以糖苷键结合成大分子的化合物，多糖又分为淀粉、纤维素和糖原，而前面两者存在于植物方面，糖原系由多糖衍化而来，是单纯的多糖。在正常的动物和人体的肝脏、心肌和骨骼肌中含量最多，存在于细胞质内。糖原能溶于水，在酶的作用下很容易分解为葡萄糖，而葡萄糖更易溶于水，当机体组织死亡后其糖原又很快分解为葡萄糖，根据糖原的特性，必须及时取新鲜组织用特殊固定液才能把糖原保存下来。

过碘酸雪夫法染色的基本原理，过碘酸是一种氧化剂，它可以把多糖的葡萄糖分子的两个相邻的带有羟基的-c-c-键打开，而生成醛基再与染色剂结合。Schiff试剂中的碱性复红液是一种混合物，经亚硫酸和二氧化硫的作用，其琨式结构的双键被破坏而消失，成为无色复红，再经过氧化后的醛基与无色复红液进行结合而呈紫红色。

二、染色应用

糖原染色应用于鉴别细胞内的空泡状变性，证明石蜡切片HE中所出现的细胞质内空泡是糖原被水溶性固定液溶解，还是脂肪被脂溶剂溶解，可进行糖原染色；在心肌病变和心血管方面的疾病；可用以观察缺血缺氧早期心肌坏死或梗死区的糖原减少；糖原累积疾病和糖尿病器官、组织、细胞中的糖原颗粒沉积；肿瘤组织中的肝细胞癌；横纹肌、平滑肌和软骨肉瘤；汗腺瘤和化学感受器瘤等，均有糖原的存在。PAS反应可以显示组织内的多糖、黏多糖、黏蛋白等。

三、染色步骤

1.用Carony固定液或无水乙醇液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水；

2.1%过碘酸水溶液氧化10min；

3.自来水洗2min，蒸馏水2min洗去过碘酸；

4.Schiff试剂反应15min；

5.流水冲洗5—10min；

6.Mayer苏木素染液复染细胞核1min；

7.自来水洗10min；

8.梯度酒精脱水，二甲苯透明，封片。

四、染色结果

糖原及其他PAS反应阳性物质呈红色、细胞核呈蓝色。

转自：“精英汇科研服务”微信公众号

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