SNB. 通过级联选择性识别反应的尿液miRNA的可视化测试条读数用于膀胱癌的非侵入性诊断

以下文章来源于分析化学方法 ，作者科研小组

全文简介

这项研究提出了一种均相无酶和基于核酸的催化发夹组装和级联识别反应策略，该策略使用钙黄绿素作为信号报告物，用于临床尿液中膀胱癌标记物miRNA-126的双重可视化(颜色和长度)和荧光信号检测。该策略基于钙黄绿素和CuS纳米颗粒(NPs)分别识别C-Ag+-C结构/Ag+/Cu2+/CuS NPs和C-Ag+-C结构/Ag+的能力。由于级联扩增和材料阳离子交换反应(CER)的整合，室温下均相无酶miRNA分析的灵敏度显著提高。该研究实现了miRNA-126的低至0.25 aM的检测限(LOD)和T24细胞单细胞水平的荧光模式。颜色和长度变化的读取模式可以在不使用仪器的情况下分别检测浓度低至5 aM和1个细胞/mL的miRNA和细胞。并且当靶miRNA被这些碱基错配的RNA替换时，观察到荧光信号的减少较少。然后对66份临床尿液样本中的miRNA-126进行定量分析。实验结果与聚合酶链反应(PCR)试剂盒、计算机断层扫描(CT)和病理结果一致。受试者工作特征(ROC)曲线显示曲线下面积(AUC)值为0.954，并且该测定显示100%特异性和90%敏感性。

简介

miRNA-126分析的可行性。CuS NPs（A）和CuS NPs + Ag+（B）的透射电子显微镜（TEM）图像。calcein（C）的紫外粘性吸收。Ag+和C-Ag+-C对Cu2+（D）的ICP-MS信号的影响。不同Cu2+（E）、Ag+（F）、Ag++ CuS NPs（G）和C-Ag+-C（H）对钙蛋白信号的影响。（I）miRNA-126分析的可行性。（J）是否涉及CuS NP和CHA的初步标准曲线。钙蛋白的浓度为25μM。

miRNA-126和T24细胞的分析性能。不同（A和B）miRNA-126浓度和（F和G）T24细胞浓度的光谱和荧光变化。不同（C）miRNA-126浓度和（H）T24细胞浓度的视觉结果。基于calcein试纸的不同（D）miRNA-126浓度和（I）T24细胞浓度的距离可视化结果。（E）miRNA-126分析的选择性。

临床膀胱癌样本的MiRNA-126分析和成像诊断。（A，B）通过拟议方法和临床RT-PCR试剂盒分析miRNA-126的结果。（C）样品的miRNA-126值的散射图。（D）miRNA-126检测的ROC分析。21-60名膀胱癌患者的临床CT图像（E）（红色圆圈是肿瘤病变区域）和21-42名膀胱癌患者的病理部分（F）。

使用离心管和钙化试纸的临床尿液样本的可视化结果。（A）临床样本视觉分析的流程图。（B）溶液颜色和（C）长度的calcacein试纸的结果.

相关成果以“Visualization test strip reading of urine miRNA via cascade selective recognition reactions for non-invasive diagnosis of bladder cancer”，发表在国际学术期刊“Sensors and Actuators B: Chemical”上。

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https://doi.org/10.1016/j.snb.2023.134286

转自：“NANO学术”微信公众号

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