以下文章来源于逍鹏生物 ,作者VivaCell&BI市场
由于血清来源于动物,且含有细胞培养中所需的各种营养(血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等),这奠定了血清是细胞培养实验中最普遍的试剂的基础。
目前血清采集地主要分布在以下国家:
市面上的牛血清产品名称虽然五花八门,但根据其不同的特性,追其根本,大致可分为以下四种。
V i v a C e l l V i v a C e l l V i v a C e l l
根据牛的取血年龄可以区分:
胎牛血清(Foetal Bovine Serum,简称FBS)
指的是取自未出生,母牛剖腹心脏穿刺采血得来的血清。
国产胎牛血清(并无明确定义,但通常用此命名)
指的是出生4-6小时,且未进行哺乳(unsuckled)进食的新生牛,有时还称作国产新生牛血清。 适用于常规细胞培养、细胞株保存和单抗研制等方面。
新生牛血清(Newborn Calf Serum,简称NBCS,或称小牛血清)
指的是出生14天-3个月进行取血的牛血清。适用于培养或对环境要求低的细胞。
成年牛血清(Adult Bovine Serum,简称ABS)
指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛血清。适用于多种动物体外培养,包括:克隆细胞、单层细胞、悬浮细胞等。
以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专门为取血而养的牛。
几种血清的比较:
项目
等级
提取血清体积/只牛 成年牛血清(5-8L) > 小牛血清 (2L) > 国产胎牛血清 (1L) > 胎牛血清 (0.5L)
培养细胞的效果 胎牛血清 > 国产胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清
价格 胎牛血清 > 国产胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清
这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。胎牛血清培养效果好于新生牛,且因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低。故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行细胞培养。
胎牛血清根据实验要求的不同又进行了特殊加工工艺加工,那么在这么多种类的血清面前,要怎么选择适合自己细胞培养的那一款呢?
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根据加工工艺的不同进行区分:
去外泌体血清
去除≥99%的胎牛血清内源外泌体,并与处理前的胎牛血清具有相同的细胞生长速率和形态。适用于收集细胞分泌的外泌体时使用。
透析血清
分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、盐离子和未结合的蛋白均被移除。透析血清主要用在进行营养成分优化和标定特定成分进行研究的实验中。
碳吸附血清
使用活性和右旋糖苷去除血清中的亲脂类(lipophilic)物质,如某些激素、细胞因子、生长因子等,去除作用对分子量大小并无区分。碳吸附胎牛血清常用于体外培养研究验证激素的作用效果。
低IgG血清
用于研究抗体、病毒和病毒反应、细胞表面抗原表位。
四环素调控胎牛血清
应用于使用敏感四环素诱导表达系统的细胞培养(Tet-on, Tet-off),以及其它对四环素敏感的实验中。
HI (热灭活)处理血清
血清热灭活是通过提高血清温度到56℃,并保持该温度30Min完成, 可以去除血清内补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解。加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究中培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
胚胎干细胞(ES)专用血清
是从多个批次的胎牛血清经过细胞培养及其他测试筛选出特定批号,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。
间充质干细胞(MSC)专用血清
从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,通过传代及分化比例测试。
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根据血清来源物种进行区分:
马血清
10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答, 常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基。
猪血清
猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养, 疫苗生产(生产支原体), 中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV), 用于诱导大鼠肝纤维化, 作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。
兔血清
正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。
羊血清
用于生物医学研究的大多数细胞系和原代培养物上,FBS的合适替代物,病毒分离和鉴定,病毒学研究。
用作鱼类细胞培养的有效NBCS替代物。
可成功地代替胎牛血清在生长培养基中长期用于环孢蘑菇的体外繁殖。
鸡血清
适用于单抗研制、规模化培养的疫苗生产、生物医学研究和诊断试剂生产。
驴血清
适用于单抗研制、免疫组化、规模化培养的疫苗生产、生物医学研究和诊断试剂生产。
小鼠血清
小鼠血清采用健康小鼠血液为原料,经无菌采集、分离、微孔过滤后而成,性状为澄清液体,无噬菌体、低内毒素,无溶血无异物无细菌真菌支原体霉形体衣原体等,适用于试验室或生化科研相关试验,满足不同科研实验的多种需求。
转自:“医学科研小坑”微信公众号
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