内容介绍
中文摘要：
目的：
探讨CCR4-NOT复合物亚基2基因（CNOT2）来源的环状RNA circRNA.0007127在凋亡通路中的作用。
创新点：
本研究发现，circRNA.0007127与K-562细胞凋亡相关，可能是一个预测K-562细胞凋亡的分子标志物。并首次证实了细胞凋亡中circRNA.0007127/miR-513a-5p/CASP8的调控轴。
方法：
使用miRanda、TargetScan和RNAhybrid软件对circRNA.0007127的靶微小RNA（miRNA）进行预测，筛选具有凋亡相关基因结合位点的miRNA。在H2O2诱导的K-562细胞中，通过定量聚合酶链反应、流式细胞术、线粒体膜电位、免疫荧光、蛋白印迹和胱天蛋白酶8（CASP8）蛋白活性实验来对circRNA.0007127及其下游靶点miR-513a-5p进行体外验证。circRNA.0007127-miR-513a-5p以及CASP8-miR-513a-5p的相互作用分别通过荧光素酶报告基因检测得到验证。
结果：
沉默circRNA.0007127通过抑制CASP8通路激活降低K-562细胞凋亡。与对照组相比，CASP8表达减少2倍，CASP8蛋白43-kD片段显著减少（P<0.05）。荧光素酶报告实验表明，circRNA.0007127可以结合miR-513a-5p或CASP8，差异极显著（P<0.001）。miR-513a-5p过表达抑制K-562细胞中CASP8基因表达水平（4倍）和CASP8蛋白43-kD片段水平（P<0.01）。挽救实验表明，circRNA.0007127 siRNA和miR-513a-5p抑制剂共转染增加CASP8基因表达和凋亡率，提示miR-513a-5p抑制剂是circRNA.0007127的拮抗分子。
结论：
CircRNA.0007127通过miR-513a-5p/CASP8轴调控K-562细胞凋亡，可作为K-562细胞新的分子靶点。
关键词组：
CircRNA.0007127；MiR-513a-5p；胱天蛋白酶8（CASP8）；凋亡；K-562细胞
作者：
Xiajing LI, Yiyu ZHANG, Ning WANG, Zhaohu YUAN, Xiaojie CHEN, Qicong CHEN, Hui DENG, Xinxin TONG, Honglin CHEN, Yuyou DUAN, Yaming WEI
本文引用格式：
Xiajing LI, Yiyu ZHANG, Ning WANG, Zhaohu YUAN, Xiaojie CHEN, Qicong CHEN, Hui DENG, Xinxin TONG, Honglin CHEN, Yuyou DUAN, Yaming WEI. CircRNA.0007127 triggers apoptosis through the miR-513a-5p/CASP8 axis in K-562 cells[J]. Journal of Zhejiang University Science B, 2022, 23(9): 732-746.
https://doi.org/10.1631/jzus.B2200048
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本文来源：浙大学报英文版
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