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如何将 T 细胞训练得更「高效」?两步拿捏

2022/6/29 9:38:25  阅读:227 发布者:

5 月 21 日,来自美国波士顿马萨诸塞州癌症研究所的 Marcelo C. Pasquini 团队发文,文章统计了 2017~2020 年间来自 78 个中心的 1,297 名患者在接受 CAR-T 治疗后的疗效,显示其总缓解率和平均缓解率均达到 ZUMA-1 研究的水平,并且对老年患者的疗效更好[1]。该项研究为 CAR-T 治疗安全性参考提供了坚实基础。


CAR-T、TCR-T 等过继性 T 细胞疗法,通过将识别肿瘤特异抗原的受体基因导入 T 细胞中,从而介导抗原识别、应答和清除,这个过程中体外激活过程至关重要。



T 细胞的体外激活过程:


T 细胞的体外激活是 T 细胞相关疗法的基础,需要同时存在特异性的抗原刺激和非特异的协同刺激两种信号。抗原特异性信号由 T 细胞受体(TCR)与抗原肽-MHC 复合物介导。非特异的共刺激信号最主要由 T 细胞表面的协同刺激分子 CD28 与抗原递呈细胞表面的配体 B7(CD80/86)相互作用促进 IL-2 的产生,增强 T 细胞的活化与增殖。在这个过程中,如果缺乏第二信号的刺激,会导致 T 细胞应答下降,甚至诱导耐受或失能状态。已有多种 T 细胞体外激活方案,主流都是通过对 CD3 和 CD28 两个信号通路同时进行刺激,使 T 细胞充分活化。在这个过程中,选择合适的激活试剂尤其重要!!!



如何选择简便高效的激活试剂:


目前商业化激活试剂有基于磁珠的和抗体偶联多聚体等,也有直接使用功能学抗体做激活的。不同类型的激活试剂在具体的实验操作上有较大的区别,甚至会直接影响最终激活效果。例如微米级 CD3、CD28 抗体偶联磁珠,为了保证与待激活细胞的严格比例,需要进行繁琐的细胞计数,且只有在准确的细胞计数下才能保证激活效果。


另外,激活试剂长期存在会对后期的细胞扩增和活性产生负面影响,在对 T 细胞刺激后都需要被去除,尤其是需要进行临床转化的产品,还需考虑是否有对应的 GMP 级别试剂,有效去除激活试剂也是质控要求。而要去除基于磁珠的激活试剂不仅需要额外的设备,操作更是耗时费力。所以,通过洗涤即可去除的可溶性激活试剂具备较大优势。


不同类型的激活试剂在重复刺激,以及重复刺激时的试剂用量也有区别,对于细胞扩增量要求较高、培养时间较长的研究,重复刺激将大大提高试剂成本。



在选择激活试剂之后,配套试剂的选择也同样重要:


其中最主要的就是 T 细胞培养的培养基和细胞因子。来自同一供应商的配套试剂经过前期的研发摸索,会更加契合整个实验方案,体系的稳定性相对较高。而对于重组细胞因子,其活性取决于正确的蛋白质折叠和翻译后修饰,即使是同一供应商的不同批次产品之间也不可避免地存在活性差异。使用逐批次活性校准的细胞因子有助于建立标准化细胞扩增培养体系,提高实验的成功率和可重复性。


T Cell TransAct™ 是德国美天旎生物技术公司基于其先进的纳米磁珠生产工艺,在纳米级聚合物基质上分别偶联人源化 CD3、CD28 抗体的新型 T 细胞激活试剂,高效模拟抗原递呈过程,在可靠激活 T 细胞的同时,保持 T 细胞的高活力和免疫功能。并且通过简便快捷的实验方案和配套试剂组合,为 T 细胞激活扩增提供最大的便利性和可重复性。


T Cell TransAct™ 有效激活 T 细胞且能快速扩增



相比基于微米级磁珠的激活试剂,T Cell TransAct™ 更有如下额外优势:



1.纳米级微粒,性质稳定可靠


✔ 不沉降,悬浮于培养基中,更均匀地接触和激活 T 细胞。

✔ 可过滤除菌,可生物降解,无菌无毒害。




2. 即用型试剂,操作简便


✔ 无需预清洗,按滴度稀释,直接使用,省去细胞计数步骤。

✔ 无需特殊的磁珠去除操作和设备,过量试剂通过简单的离心清洗即可去除。



3. 有相应的 MACS GMP 级产品,无缝衔接临床研究,并可在美天旎 CliniMACS Prodigy® 平台上实现全自动的细胞处理过程



4. 美天旎优化的整体解决方案:


 两种类型可选的人 T 细胞激活试剂


除了创新的 T Cell TransAct,美天旎同样提供基于微米级磁珠的人 T Cell Activation/Expansion kit,以便使用者根据操作习惯来进行选择。


 基于纳米级磁珠和分选柱的 MACS® 细胞分选


使用最少量的磁珠标记即可获得高纯度、高活力的目的细胞,同时提供多种分选策略满足不同实验需求,如阳性分选或完全无接触的阴性分选。


 高性能的 T 细胞扩增完全培养基 TexMACSTM GMP Medium


专为 T 细胞培养优化,满足 T 细胞和调节性 T 细胞扩增需求,无血清、无动物源成分,符合 GMP 标准,高批间稳定性,完整可追溯文件。


 MACS® 优质级细胞因子


采用国际标准对每一批次产品校准生物活性,确定准确的单位剂量,无需过饱和添加,确保实验结果可重复且可比。对于T细胞扩增,更提供 IL-2 和 IL-7 + IL-15 的两种优化方案。IL-7 和 IL-15 的组合能够避免因为调节性 T 细胞扩增导致削弱抗肿瘤免疫,同时更利于干性和中央记忆 T 细胞的增殖。


内容策划:康晋伟 邹礼平
项目审核:周育红

题图来源:图虫创意


参考文献:[1]. Jacobson CA, Locke FL, Ma L, Asubonteng J, Hu ZH, Siddiqi T, Ahmed S, Ghobadi A, Miklos DB, Lin Y, Perales MA, Lunning MA, Herr MM, Hill BT, Ganguly S, Dong H, Nikiforow S, Hooper M, Kawashima J, Xu H, Pasquini MC. Real-world Evidence of Axicabtagene Ciloleucel for the Treatment of Large B-Cell Lymphoma in the United States. Transplant Cell Ther. 2022 May 21:S2666-6367(22)01319-7. doi: 10.1016/j.jtct.2022.05.026. Epub ahead of print. PMID: 35609867

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